Comment traduire arnm en protéine

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    Toutes les protéines sont codées par des gènes et faites lors de la traduction de l`ARNm.

    Les gènes codent pour des protéines qui sont utilisées dans nos cellules pour exécuter des fonctions telles que le métabolisme énergétique, la biosynthèse et la division cellulaire. Les protéines sont construites à partir des acides aminés reliés par des liaisons peptidiques. "Traduction" est un processus par lequel un acide ribonucléique messager (ARNm), qui est essentiellement une copie du gène particulier, qui est utilisé comme matrice pour construire une protéine. Dans la nature, la traduction des protéines qui se passe dans une cellule vivante, mais les biologistes moléculaires ont appris à faire des protéines dans le laboratoire. Cette technique est utilisée pour l`identification rapide de produits de gènes, des études de repliement des protéines, des études de mutation et des études fonctionnelles.

    Choses que vous devez

    • Votre ARNm
    • Lapin réticulocytes Système Lysate
    • Acide aminé Mélange moins la methionine
    • Acide aminé Mélange moins Leucine
    • RNasin
    • Transcend ARNt
    • Pipettes et conseils
    • tube Microcentrifugeuse

    • Combinez tous les composants dans un tube à centrifuger: Pipet 35 microlitres Lapin réticulocytes Système Lysate, 0,5 microlitres des mélanges d`acides aminés, 1 microlitre de RNasin, 2 microlitres d`ARNm et 1 microlitre de ARNt ensemble, et mélanger. Le réticulocytes système Lysate Lapin comprend toutes les molécules qui se trouvent à l`intérieur de nos cellules et nécessaires pour la traduction, y compris les ribosomes et les facteurs d`initiation. Cette étape préparera tout est prêt pour la traduction. Votre molécule d`ARNm se fixe à un ribosome, et les facteurs d`initiation de l`assemblage. Des molécules appelées ARNt sont associés à leurs acides aminés et sont prêts à construire la protéine.




    • Chauffer le mélange réactionnel à 30 degrés Celsius. La traduction va commencer au cours de cette étape. Le message de l`ARNm "lire" par les ARNt. Chaque porte-ARNt d`un acide aminé, et ces acides aminés sont joints ensemble pour former la protéine.

    • Attendre 90 minutes pour la traduction de procéder. ARNt conservent apporter de nouveaux acides aminés en fonction du message de l`ARNm. Une fois que l`ARNm est entièrement lu, la traduction se termine et la protéine est prête.

    • Purifier votre protéine par SDS-PAGE. Il est prêt pour les essais fonctionnels.

    Conseils & Avertissements

    • techniques de clonage moléculaire sont sensibles et nécessitent un environnement stérile. Portez des gants et une blouse de laboratoire.
    • Ne pas manger ni boire tout en travaillant dans le laboratoire.
    Éducation / College & enseignement supérieur / Université

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