Northern blots sont la plupart du temps un outil dans l`ARN (acide ribonucléique) recherche. L`ARN est extrait de l`échantillon et sur un gel d`électrophorèse, qui est ensuite transféré sur une membrane filtrante. Le type d`ARN qui est utilisé dans les Northern blots de l`ARNm est (RNA messager), le produit de transcription de l`ADN.
L`interprétation des résultats de la Northern blot comprend l`incubation du blot et le laver pour éliminer toute sonde non liée afin de visualiser la sonde liée.
Choses que vous devez
- ARNm
- Gel Electrophoresis
- RNase stringence basse et haute sans tampons de lavage
- Étiqueté sonde
Transférer le brin d`ARNm du gel à la membrane. Incuber le brin avec un homologue de solution de sonde à l`ARNm que vous utilisez. La sonde contient un indicateur de votre ARN d`intérêt afin de visualiser plus tard. Si les paires de bases de la sonde sont complémentaires, la sonde se joindre à votre ARNm.
Laver le brin d`ARNm avec RNase tampons basse et haute lavage de stringence libres pour éliminer toute sonde non liée.
Rechercher un groupe qui se forme. Si une forme de bande, qui indique que l`ARNm est homologue à la sonde. Si aucune forme de bande qui indique qu`il n`y a pas homologue. Ces résultats indiquent dans quel type de cellules ou de tissus de votre ARN d`intérêt est le plus abondant.