Comment déterminer la taille de l`échantillon
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L`électrophorèse sur gel est une technique qui est utilisée pour séparer et analyser des molécules. Cette technique utilise un courant électrique pour séparer les molécules en fonction de leur taille et de la charge moléculaire. Ce procédé peut être utilisé sur des molécules telles que des acides nucléiques (ADN et ARN) et des protéines. Si cela est fait correctement, lorsque l`électrophorèse est terminée, il y aura une rangée de bandes bien définies dans le gel. Cependant, certaines erreurs peuvent provoquer des bavures, et les bandes ne seront pas distinguables.
Smearing peut être causée par un gel mal préparé. Selon l`Université Rice, si le gel ne soit pas versé correctement, il ne sera pas polymériser ou se solidifier de façon égale, provoquant ainsi les molécules à frottis.
L`échantillon de la molécule est placée dans les puits à une extrémité du gel. Si ces puits sont remplis trop, ou si l`échantillon est pas correctement dilué, l`excès d`échantillon peut étaler à travers le gel. De plus, si le gel est déplacé après que l`échantillon est placé dans le puits, il peut provoquer l`échantillon à déborder du puits. Cela peut aussi provoquer des bavures.
Lors de la préparation de l`échantillon de protéine ou d`acide nucléique, il est décomposé en utilisant une enzyme qui coupe la molécule en des endroits spécifiques. Selon "Restriction Digestion / Gel Electrophoresis," si cela ne se fait pas correctement, l`enzyme peut décomposer la molécule trop, ce qui entraîne un maculage. En outre, le choix d`un tampon incorrect ou la température peut également provoquer l`enzyme de fonctionner correctement, causant des traînées.
Selon "Nucleic Acid Gel Electrophoresis", une autre cause de maculage est la contamination de l`échantillon. Par exemple, un échantillon d`ADN peut être contaminée avec une protéine ou d`un échantillon de protéine peut être contaminée par des lipides ou des graisses.
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