Les inconvénients d`une électrophorèse sur gel

Electrophorresis A Analyse d`échantillon limitée

Mesures d`électrophorèse ne sont pas précis

• 
  
  
  
  

  L`électrophorèse sur gel peut effectivement séparer des protéines similaires avec des poids différents (ce qui est une technique appelée Western blot). Il peut les séparer plus précisément grâce à une technique connue sous le nom 2d electrophoresis- ce qui est commun en protéomique.

  Malheureusement, toutes les mesures effectuées à partir de cette technique sont semi-quantitative au mieux. Afin d`obtenir la masse précise (en poids) des protéines, la spectroscopie de masse doit être utilisée après que la protéine a été purifiée par électrophorèse. En outre, en comparant les quantités relatives des différentes molécules dépend de la densité de la bande (obscurité) de différentes taches sur le gel. Cette méthode a un certain degré d`erreur, et les échantillons sont habituellement exécuté plusieurs fois pour obtenir des résultats propres.

Substantielle échantillon de départ est requis

Seuls certains Molécules peuvent être visualisées

• Electrophoresis est excellent à séparer et à moyen d`identification à grande taille biomolécules. Cependant, la plupart des molécules que les chercheurs souhaitent regarder sont de petites hormones, les neurotransmetteurs à plus petite, et les ions ne peuvent pas être mesurés par électrophorèse. Ceci pour deux raisons: ils ne réagissent pas correctement avec la préparation d`électrophorèse (habituellement une technique appelée SDS PAGE) et, même si elles le faisaient, ils sont trop petits pour séparer correctement et se précipitaient sur le fond du gel. Ces molécules sont plutôt mesurées par des techniques telles que les dosages immunologiques RIAAs (radio) et des tests ELISA (Test immunoenzymatique).

Electrophoresis est faible débit

• L`électrophorèse sur gel est généralement un faible débit, ce qui signifie qu`il ne se produit pas de données particulièrement rapide. Contraste électrophorèse, où vous pouvez regarder une petite poignée de molécules d`ARN à la fois, avec la PCR (réaction en chaîne par polymérase), qui peut simultanément évaluer des milliers d`échantillons. De même, la cytométrie en flux peut prendre des mesures à partir des milliers de cellules individuelles et de faire des corrélations complexes, alors que l`électrophorèse regarde les cellules en masse et ne peut pas faire de telles discriminations fines. PCR et le débit représentent cytométrie massivement processus parallèles et série, respectivement, et les deux dépassent de loin les capacités de l`électrophorèse pour générer des données de recherche.