Comment utiliser les bactéries dans le génie génétique

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Les bactéries sont des outils utiles pour la modification génétique. Grâce à l`utilisation des plasmides, des portions circulaires d`ADN bactérien interchangeables, des organismes tels que d`autres bactéries peuvent être transformées génétiquement. Ce guide décrit les méthodes de base liés à l`utilisation des bactéries pour le génie génétique d`un autre organisme.

Choses que vous devez

  • espèces de bactéries non létales (de préférence une variante inoffensive de Escherichia coli)
  • Deuxième espèces de bactéries non létales
  • boîte de Pétri
  • Les bactéries incubateur
  • Les enzymes de restriction pour le gène cible
  • 2 boucles stériles
  • Bain d`eau chaude
  • Tube à essai

  1. Préparation du gène d`intérêt

  2. 1

    Obtenir un échantillon des premières espèces de bactéries en tamponnant la colonie fermée avec une boucle stérile.

  3. 2

    Onduler la boucle inoculée dans un tube à essai dans un bain d`eau à environ 48 ° C pendant cinq secondes.

  4. 3



    Ajouter quelques millilitres d`enzyme de restriction sur le tube à essai et on chauffe, en boucle inoculé. Cette enzyme de restriction varie en fonction du gène d`intérêt, qui seront transférés à d`autres espèces bactériennes.

    5. Transformer les autres espèces de bactéries

    • 1

      Tremper une seconde boucle stérile dans une colonie de la seconde espèce de bactéries, celle qui doit être transformée.

    • 2

      Répartir les bactéries uniformément dans une boîte de Pétri contenant du milieu d`agarose en faisant glisser la boucle inoculée à travers l`agarose.

    • 3

      Laissez les bactéries incuber pendant deux jours dans un incubateur, de telle sorte que les colonies bactériennes sont formées.

    • 4

      Ajouter le mélange précédemment créé contenant le gène d`intérêt pour la boîte de Petri contenant des colonies bactériennes.

    • 5

      Laissez les bactéries incuber pendant deux jours dans l`incubateur. Cela permet à l`espèce à l`absorption des gènes ajoutés au plat et les insérer dans leurs génomes.

    • 6

      Concevoir une méthode pour tester les bactéries transformées pour voir si elles assimilées les gènes. Par exemple, si le gène ajouté confère une résistance aux antibiotiques des bactéries, il peut être utile d`ajouter des disques d`ampicilline à la plaque de gélose. Si elles survivent, ils ont pris le gène.

Conseils & Avertissements

  • Lors du choix d`un gène à utiliser pour la transformation, pour choisir un gène qui peut être prélevée d`une autre bactérie facilement.
  • Assurez-vous également de choisir un gène qui peut être testée pour voir si la procédure a fonctionné. Par exemple, un gène qui rend les bactéries brillent est facilement testable par la vue.
  • Utilisez un soin extrême lorsque l`on travaille avec des bactéries, létales ou non létales.
  • Se laver les mains avec un savon antibactérien avant, pendant et après les travaux avec des bactéries dans le génie génétique.

Ressources

  • Crédit photo http://vedicsciences.net/design/bacteria5.jpg
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