Une enzyme est une protéine qui catalyse (augmente la vitesse de réactions chimiques). La température optimale de la plupart des enzymes, ou la température à laquelle les enzymes mieux faciliter la réaction, est compris entre 35 et 40 degrés Celsius. L`augmentation de la température au sein de cette fenêtre augmente la vitesse de réaction, car il excite les molécules et augmente la vitesse à laquelle les enzymes / réactifs entrent en collision et réagissent à fabriquer un produit. Cependant, l`augmentation de la température trop peut dénaturer l`enzyme et l`empêcher de fonctionner du tout.
Déterminer la température optimale de l`enzyme en chauffant la réaction en quantités et en prenant infinitesmal de petits échantillons de la réaction, afin de déterminer quand le taux maximal de production de ce produit se produit.
Choses que vous devez
- Enzyme
- Substrat
- Kit de dosage pour le produit
- flacon à scintillation
- Gobelet
- Plaque chauffante
- Thermomètre
Sélectionnez une méthode. Déterminez comment vous allez mesurer la concentration de votre produit à divers points dans l`expérience. Par exemple, on peut mesurer la concentration de nombreux produits à l`aide d`un spectrophotomètre et en calculant la concentration de l`absorbance, la fluorescence ou par la mesure et le calcul de la concentration de la fluorescence.
Configurez votre expérience. Placer les réactifs et les enzymes dans un petit récipient avec un couvercle, tel qu`un flacon à scintillation. La réaction commence. Placer le flacon à scintillation dans un plus grand bécher d`eau à température ambiante. Placer le bêcher sur une plaque chauffante. Placer un thermomètre à l`intérieur du bêcher. Cela vous permet de mesurer la température de la réaction à différents points.
Prélever un échantillon de 100 microlitres de la réaction à la température ambiante, à environ 25 degrés Celsius. Tourner la plaque chauffante sur. A différentes températures comprises entre 30 et 40 degrés Celsius (30,5, 31, 31,5, etc.) prendre des échantillons de 100 microlitres de votre réaction.
Déterminer la concentration de votre produit à chaque température. Lorsque la température monte au-dessus de 40 degrés Celsius, vous verrez une diminution de la vitesse à laquelle le substrat est converti en produit, car l`enzyme est dénaturée. Le point auquel le produit est en cours de production au taux maximum est le point où la température est à son optimum.
