Comment effectuer une clhp

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    Exécution de CLHP est une compétence technique.

    Effectuer un test HPLC (chromatographie en phase liquide à haute performance) est une compétence technique qui ne devrait être effectuée par un personnel qualifié. HPLC a été de plus en plus utilisé dans les laboratoires depuis les années 1980. Il est utilisé pour la recherche et dans les laboratoires et les universités pour séparer et identifier des molécules ou des composés organiques complexes. Le système peut être exécuté en phase normale ou inversée.


    La machine HPLC est constitué d`un réservoir, dégazeur, injecteur, colonne associée au four et détecteur, intégrateur et logiciels (voir la Ressource 1).

    Choses que vous devez

    • Logiciel
    • Ordinateur
    • HPLC
    • seau à déchets
    • Réactif (méthanol / eau)
    • pH (papier de tournesol)
    • Électricité

    HPLC Courir

    • Mettez la machine HPLC suivant les directives du fabricant. Mettre en place l`instrumentation (voir référence 1). Réglage de la HPLC correctement est l`aspect principal de ce test et il y a une technique standard. Choisissez la bonne méthode pour les substances à analyser en HPLC.

      Placez la colonne de droite de la manière correcte suivant le placement flèche montrant. Régler la longueur d`onde pour être en mesure de détecter les composés complexes. Mettre en place la bonne température.




      Laver la colonne avec 50% de methanol et d`eau pendant 30 minutes. Permettre à la phase mobile de passer à travers.

      Configurer le débit comme indiqué dans la méthodologie.

    • La phase mobile HPLC est critique et des résultats satisfaisants dépendent du fait que la préparation a été effectuée correctement (voir référence 2). Il existe deux types de phase mobile utilisée en HPLC, élution par gradient ou isocratiques. Une élution par gradient est l`endroit où les deux phases mobiles organiques sont nécessaires, à des moments différents. Avec élution isocratique, une seule phase organique est nécessaire (méthanol / eau).

    • Veiller à ce que la machine de HPLC et l`ordinateur sont reliés par un câble RS232 pour permettre l`information de circuler entre les deux machines (voir référence 3).

    • Préparer l`échantillon conformément à la spécification dans la méthodologie. Choisissez la méthode analytique spécifique désirée et enregistré sur l`ordinateur.

      Choisir le bon CLHP quand il y a beaucoup de machines de CLHP liées. Aller à l`instrument et ouvrez la liste des échantillons.

      Ouvrez une fenêtre et d`écrire le nom et la date du test. Sauvegarde le.

    • La liste de l`échantillon apparaîtra sous forme de tableau. Remplissez les détails sur le tableau pour l`échantillon que vous avez préparé.

      Placer les flacons correctement l`échantillon dans la machine en fonction de la méthodologie. Appuyez sur start pour commencer l`analyse.

    Conseils & Avertissements

    • Toutes les étapes de HPLC et la préparation de l`échantillon doit être correct afin d`éviter un test de répétition. enquêtes répétées coûtent du temps et de l`argent.

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