Types de microscopes à fluorescence

Dans un microscope confocal l`alignement est très sensible. Si la tache laser, l`objectif du microscope, l`optique de collecte et le sténopé sont éteints la moindre quantité de la performance du microscope souffre. Un microscope multiphotonique contourne ce problème en utilisant une longueur d`onde de laser qui est seulement la moitié aussi énergique que ce doit être pour exciter les fluorophores dans l`échantillon. La seule façon dont les fluorophores auront excité et émettre une fluorescence est si la lumière laser est suffisamment lumineux pour que deux particules de lumière - les photons - frapper le fluorophore dans un temps très court. Cela se produit uniquement lorsque le laser est focalisé à un très petit point. Donc, le seul endroit dans l`échantillon qui émettent de la lumière est là où le laser est focalisé, ce qui maintient l`image agréable et propre car il n`y a pas de lumière d`arrière-plan supplémentaire pour se débarrasser de - ce qui signifie pas sténopé à aligner.

Une autre façon d`obtenir des images très propres est de veiller à la lumière d`excitation ne reçoit pas très loin dans l`échantillon. Si une goutte de neurones, par exemple, est placé dans une goutte de solution sur une lamelle de verre, puis certains des neurones adhèrent à la surface du verre. Dans une fluorescence à réflexion interne (FRBR) microscope totale la lumière est dirigée latéralement dans la lame de verre de sorte qu`il n`a pas vraiment dans la solution en maintenant les cellules. Mais une partie de la lumière fuit à peine dans la solution - juste très proche de la surface du verre. Cela signifie que les seuls endroits qui émettent de la lumière sera dans une région très mince tout contre la surface du verre. Pour quelque chose comme les neurones, où tant de choses intéressantes qui se passe sur la surface des cellules, cette technique peut être très efficace.